Вирус гепатита С
Этиология. Вирус гепатита С (Hepatitis С Virus, HСV) — РНК содержащий вирус, относится к семейству Flaviviridae. Является наиболее частым возбудителем трансмиссивных гепатитов в мире: причиной примерно 20% случаев острого гепатита, 60–70% хронического гепатита и примерно 30% цирроза и рака печени. На сегодняшний день известно 11 генотипов вируса и более 100 его субтипов. Термин «генотип " имеет отношение к генетическому строению вируса: по общепринятой классификации генотип обозначается числом, а подтип маленькой буквой латинского алфавита. Генотипирование необходимо проводить для определения прогноза заболевания, эффективности противовирусной терапии и определения продолжительности курса терапии. У пациентов с генотипом 1b хронизация
Эпидемиология. Вирус гепатита С (HСV) передается преимущественно парентеральным путем, причем процент случаев инфицирования ВГС выше среди пациентов, перенесших трансплантацию органов, гемотрансфузию, получающих множественные внутривенные инъекции (наркоманы) а также у находящихся на почечном диализе. До
Клинические проявления. Инкубационный период составляет 1–6 месяцев, острый период в 75% случаев протекает бессимптомно, в безжелтушной форме и поэтому часто не диагностируется на этом этапе.
Диагностика
Лабораторная диагностика вирусного гепатита С основывается на:
- методах непрямого выявления вируса — выявление серологических маркеров (антител к антигенам вируса). Данные методы позволяют устанавливать инфицирование вирусом, оценивать наличие защитного иммунитета, дифференцировать стадии заболевания, выявлять окончание репликации вируса;
- методах прямого выявления вируса: выявление РНК вируса в исследуемом биологическом материале методом ПЦР. Данные методы позволяют не только установить этиологию, но и оценить активность вируса — выявить репликативную стадию, установить генотип вируса.
Серологическая диагностика. Антитела класса М появляются через 4–6 недель после инфицирования, и сохраняются до 5–6 месяцев при первичном инфицировании. Уровень IgM может повышаться вновь во время следующей реактивации инфекции.
Антитела класса G появляются с 11–12 недели после инфицирования, достигают пика концентрации к 5–6 месяцу и сохраняются в крови на постоянном уровне в течение всего периода болезни и реконвалесценции, затем снижаются и могут сохраняться на минимальном уровне пожизненно. В некоторых случаях полностью исчезают. Ложноотрицательные результаты выявления антител могут быть у пациентов с ослабленным иммунитетом (
Молекулярные методы выявления вируса гепатита С позволяют выявить РНК в качественном (обнаружено/не обнаружено) формате, количественном (не обнаружено/обнаружено в количестве) формате, определить генотип вируса. Каждый формат позволяет решить определенные диагностические задачи. Выявление РНК вируса в качественном формате позволяет выявить репликативную стадию вируса и ответить на вопрос о активности: данное исследование проводится пациентам как с серопозитивными результатами, так и серонегативными, когда данный метод позволяет установить этиологию гепатита.
Количественный анализ проводится методом ПЦР в реальном времени, что является наиболее чувствительным методом. После внедрения стандарта ВОЗ результаты количественной ПЦР унифицированы для возможности оценки динамики при обследовании в различных лабораториях. Результаты представляются в международных единицах (МЕ). Каждый набор для количественного выявления РНК ВГС имеет коэффициент для пересчета «копий в мл» в «МЕ в мл». Данный формат оценки РНК вируса применяется перед стартом противовирусной терапии для определения вирусной нагрузки и контроля эффективности терапии (вирусологического ответа), подтверждения элиминации виремии.
Изучение генотипа необходимо для определения прогноза заболевания. Кроме того, существуют данные о том, что преимущественный путь передачи так же зависит от генотипа вируса. Считается, что тип 1в более характерен для трансфузионного пути передачи, а 1а и 3а — при употреблении наркотиков. Кроме того, тип вируса имеет прогностическое значение для прогноза эффективности терапии и оценки длительности.
Решение о схеме лечения основывается на первоначальной вирусной нагрузке и генотипе вируса. Длительность терапии зависит от 4 факторов — начальной вирусной нагрузки, динамики снижения виремии, времени достижения нулевой вирусной нагрузки и развития фиброза.
При инфицировании генотипом 2 или 3 продолжительность терапии составляет не менее 24 недель с вероятностью формирования стойкого вирусологического ответа около 70%. При инфицировании вирусом первого генотипа (а также и 4, 5 или 6) продолжительность терапии должна составлять не менее 48 недель и вероятность стойкого вирусологического ответа колеблется в районе 45%. При наличии 1, 4, 5 или 6 генотипов обязательно необходимо определять показатель вирусной нагрузки перед стартом терапии. Вирусная нагрузка менее 400 000 МЕ/мл считается низкой, более 400 000 МЕ/мл — высокой. Необходимо повторить определение ВН через 12 недель терапии. В случае, если снижение показателя составляет не менее 2 логарифмов терапию продолжают до 72 недель. Если же ВН не снижается на 2 логарифма и более — лечение прекращают в связи с недостаточным вирусологическим ответом. Целью терапии является достижение неопределимой вирусной нагрузки, что должно быть подтверждено через 6 месяцев после окончания терапии.
Другой алгоритм принятия решения основан на времени достижения вирусологического ответа вне зависимости от генотипа вируса. Отсутствие снижения уровня вирусной нагрузки как минимум на 1 lg после
Согласно рекомендациям ВОЗ, установление диагноза гепатита С возможно на основании троекратного обнаружения РНК HCV в. сыворотке крови больного при отсутствии других маркеров гепатита. Вирус гепатита С отличается высокой изменчивостью и наличием нескольких вариантов генотипа: в лаборатории «Синэво» определяют 1a, 1b, 2, 3a, 4. Генотипирование необходимо проводить для определения прогноза заболевания, эффективности противовирусной терапии и определения продолжительности курса терапии. Проведение ПЦР позволяет выявить РНК ВГС не только в сыворотке крови, но и в биоптате печени, что важно при подтверждении роли ВГС в формировании гепатоцеллюлярной карциномы. У подобных больных РНК ВГС регистрируется в гепатоцитах и при отсутствии
Алгоритмы обследования и интерпретации полученных результатов:
- при положительном результате
анти-ВГС антител необходимо качественное определение РНК ВГС (ПЦР). Положительный результат ПЦР подтверждает наличие вируса, однако не говорит о развитии гепатита; - при отрицательном результате
анти-ВГС антител и наличии подозрения на острый гепатит С проводится качественное определение РНК ВГС. При положительном результате ПЦР диагноз подтверждается, в последующем необходимо повторно провести серологическое тестирование для подтверждения сероконверсии. При наличии иммуносупрессии и эпидемиологических или лабораторных причин для подозренияВГС-инфекции необходимо проведение качественной ПЦР вне зависимости от результата серологического тестирования; - у пациентов, находящихся на гемодиализе и после трансплантации почки необходим ежегодный мониторинг антител к ВГС;
- ПЦР необходимо проводить и у серопозитивных беременных для оценки риска вертикального заражения. Риск заражения плода колеблется от 0% до 5%, однако при
ВИЧ-коинфекции у матери риск заражения возрастает от 15% до 30%.
Серологическая диагностика
Вирус гепатита C (HCV), антитела суммарные
Код услуги: 2013 . Вирус гепатита C (HCV), антитела суммарные
Прокрутить страницу вверхВирус гепатита C (HCV), антитела IgM
Код услуги: 2012 . Вирус гепатита C (HCV), антитела IgM
Прокрутить страницу вверхПоказатель | Характеристика |
---|---|
Анализатор и тест-система | Cobas 6000, Roche Diagnostics (Швейцария). Vitrotest (СНГ) |
Референтные значения: Вирус гепатита C (HCV), антитела суммарные, Индекс: < 0,9 - отрицательный результат; 0,9 -- 1,0 - сомнительный результат; => 1,0 - положительный результат Вирус гепатита C (HCV) (антигены cor, NS3, NS4, NS5), антитела IgG, R: R (коэффициент позитивности) - это оптическая плотность образца/критическую оптическую плотность. R >= 1,0 - позитивный результат; R <1,0 - негативный результат Вирус гепатита C (HCV), антитела IgM, R: R >= 1,0 - позитивный результат; R <1,0 - негативный результат Вирус гепатита С (HCV), авидность антител IgG, %: Менее 37,0 - низкая авидность. Более или равно 37,0 - высокая авидность |
Vitrotest (СНГ)
Вирус гепатита C (HCV), антитела суммарные, Индекс:
< 0,9 - отрицательный результат; 0,9 -- 1,0 - сомнительный результат; => 1,0 - положительный результат
Вирус гепатита C (HCV) (антигены cor, NS3, NS4, NS5), антитела IgG, R:
R (коэффициент позитивности) - это оптическая плотность образца/критическую оптическую плотность.
R >= 1,0 - позитивный результат; R <1,0 - негативный результат
Вирус гепатита C (HCV), антитела IgM, R:
R >= 1,0 - позитивный результат; R <1,0 - негативный результат
Вирус гепатита С (HCV), авидность антител IgG, %:
Менее 37,0 - низкая авидность. Более или равно 37,0 - высокая авидность
Вирус гепатита C (HCV), антитела суммарные
Показания к назначению | |
---|---|
Скрининговый маркер HCV-инфекции
| |
Интерпретация результатов | |
Положительный результат | Отрицательный результат |
|
|
- Обследование пациентов из группы риска (множественные гемотрансфузии, инъекционные наркоманы);
- клиника острого гепатита, повышение уровня трансаминаз -- проведение дифференциального диагноза этиологии;
- после контакта с возможно инфицированной кровью;
- ребенок, рожденный от матери, инфицированной HCV (исследование рекомендовано в возрасте 18 месяцев);
- подготовка к оперативному вмешательству;
- скрининговое обследование всех беременных.
- Гепатит С (острый или хронический);
- перенесенная HCV-инфекция в прошлом;
- результат гемотрансфузии (необходим контроль в динамике);
- ложноположительные результаты -- требуется подтверждение выявления антител другим методом в другой биологической пробе.
- Отсутствие HCV-инфекции;
- первые 4-6 недель инкубационного периода гепатита С;
- «серонегативный» гепатит С.
Вирус гепатита C (HCV) (антигены cor, NS3, NS4, NS5), антитела IgG
Показания к назначению | |
---|---|
Подтверждающий серологический тест HCV-инфекции
| |
Интерпретация результатов | |
Положительный результат | Отрицательный результат |
|
|
- Положительные результаты суммарных антител HCV;
- обследование пациентов из группы риска (множественные гемотрансфузии, инъекционные наркоманы);
- клиника острого гепатита, повышение уровня трансаминаз -- проведение дифференциального диагноза этиологии;
- после контакта с возможно инфицированной кровью;
- ребенок, рожденный от матери, инфицированной HCV (исследование рекомендовано в возрасте 18 месяцев);
- подготовка к оперативному вмешательству;
- скрининговое обследование всех беременных.
- Гепатит С (острый или хронический);
- перенесенная HCV-инфекция в прошлом;
- результат гемотрансфузии (необходим контроль в динамике).
- Отсутствие HCV-инфекции;
- первые 4-6 недель инкубационного периода гепатита С;
- «серонегативный» гепатит С.
Вирус гепатита C (HCV), антитела IgM
Показания к назначению | |
---|---|
Маркер острой стадии инфекционного процесса (первичного инфицирования или реактивации)
| |
Интерпретация результатов | |
В случае получения сомнительного результата необходимо определение IgG. Повторить в парной сыворотке через 2 недели определение IgМ и IgG. | |
Положительный результат | Отрицательный результат |
|
|
- Дифференциальная диагностика этиологии гепатита;
- оценка острого периода HCV-инфекции при первичном инфицировании и хроническом течении заболевания.
- Острая стадия первичной HCV-инфекции;
- реактивация HCV-инфекции;
- врожденная HCV-инфекция (у новорожденных);
- ложноположительный результат.
- Отсутствие инфицирования HCV;
- ранний инкубационный период инфицирования HCV;
- отсутствие острой стадии при первичном инфицировании или реактивации;
- нельзя исключить врожденную HCV-инфекцию (у 10-30% новорожденных не синтезируются);
- инфицирование HCV в прошлом.
Вирус гепатита С (HCV), авидность антител IgG
Показания к назначению | |
---|---|
Маркер давности инфицирования вирусом
| |
Интерпретация результатов | |
Исследование проводится только после предварительного выявления IgG. В случае получения средней авидности необходимо дополнительное обследование для исключения первичного инфицирования: определение IgМ, IgG в парной сыворотке, молекулярные методы выявления вируса (методом ПЦР). | |
Низкая авидность | Высокая авидность |
Инфицирование HCV за 3 -- 4 месяца до тестирования. | Инфицирование HCV более чем 3 -- 4 месяца до тестирования. |
- Оценка давности инфицирования вирусом в случае выявления IgG к HCV;
- дифференциальная диагностика первичного инфицирования HCV во время беременности (при выявлении положительных результатов IgG или суммарных антител).
Молекулярные методы диагностики
ПЦР. Вирус гепатита C (кровь, качествен. определение, Real-time)
Код услуги: 3003 . ПЦР. Вирус гепатита C (кровь, качествен. определение, Real-time)
Прокрутить страницу вверхПоказатель | Характеристика |
---|---|
Анализатор и тест-система | Детектирующий амплификатор ДТ-96 (ДНК-технология), детектирующий амплификатор Rotor-Gene («Corbett Research», Австралия). ТС -АмплиСенс |
Референтные значения: Обнаружен / Не обнаружен Аналитическая чувствительность тест-системы: 100 МЕ/мл (400 копий РНК/мл). | |
Интерферирующие факторы. Медикаменты | |
Данный вид исследований действителен только для плазмы, отобранной с антикоагулянтом ЭДТА. Анализ других видов проб может привести к ложноположительным или ложноотрицательным результатам. Содержание гепарина в крови может ингибировать протекание метода ПЦР. | |
Показания к назначению | |
Маркер наличия вируса гепатита С в исследуемом биологическом материале
| |
Интерпретация результатов | |
Обнаружен | Не обнаружен |
|
|
Аналитическая чувствительность тест-системы: 100 МЕ/мл (400 копий РНК/мл).
- Положительные результаты серологических маркеров HCV-инфекции (выявление IgM, IgG, суммарных антител к HCV);
- исключение гепатита С при серонегативных результатах HCV-инфекции (отсутствие IgM, IgG, суммарных антител к HCV);
- обследование лиц из группы высокого риска (пациенты на гемодиализе, после трансплантации, гемотрансфузий, получающие иммуносупрессивную терапию, инъекционные наркоманы) независимо от данных серологических маркеров;
- всем серопозитивным беременным;
- диагностика врожденной HCV- инфекции у детей;
- оценка контагиозности человека -- выявление выделения вируса с различными биологическими жидкостями.
- Наличие репликации вируса гепатита С.
- Отсутствие репликации вируса;
- отсутствие HCV-инфекции;
- низкое количество вируса в исследуемом материале (ниже линейного предела);
- ложноотрицательные результаты при наличии ингибиторов ПЦР в крови.
Показания к назначению | |
---|---|
| |
Интерпретация результатов | |
Обнаружен в количестве | Не обнаружен |
|
|
- Положительные результаты выявления РНК HCV для определения уровня виремии;
- мониторинг виремии;
- мониторинг эффективности противовирусной терапии: контроль динамики снижения уровня вирусной нагрузки или исчезновения РНК HCV в определенные недели терапии.
- Репликативная стадия HCV;
- при контроле эффективности лечения оценка динамики степени снижения lg на определенных неделях лечения.
- В исследуемом материале HCV не обнаружен: нет вирусемии;
- в исследуемом материале HCV не обнаружен: нет HCV-инфекции;
- низкое количество HCV в исследуемом материале (ниже линейного предела);
- ложноотрицательные результаты при наличии ингибиторов ПЦР в крови.
Показатель | Характеристика |
---|---|
Анализатор и тест-система | Детектирующий амплификатор Rotor-Gene («Corbett Research», Австралия). ТС-АмплиСенс |
Референтные значения: Не типируется Аналитическая чувствительность тест-системы: 5x103 МЕ/мл (1,35х104 копий/мл) | |
Показания к назначению | |
У пациентов с положительными результатами выявления РНК вируса гепатита С методом ПЦР определение:
| |
Интерпретация результатов | |
Оценка наличия вируса гепатита С и его генотипа | |
Генотип 1b | В 90% случаев приводит к хроническому течению, наблюдается более тяжелое течение, чаще развивается фиброз, цирроз, гепатоцеллюлярная карцинома. Высокая резистентность к лечению: устойчивый эффект при монотерапии развивается у 18% пациентов (при комбинированной -- у 28%). |
Другие генотипы (2а, 3а) | Хроническое течение развивается только в 35 -- 50% случаев, менее тяжелое течение, чаще развивается стеатоз. Более высокая чувствительность к противовирусной терапии: устойчивый эффект достигается у 55 % пациентов на монотерапии (66 % на комбинированной). |
Аналитическая чувствительность тест-системы: 5x103 МЕ/мл (1,35х104 копий/мл)
- прогноза заболевания (риск хронического течения, развития цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы);
- прогноза эффективности противовирусной терапии (при решении вопроса о старте терапии);
- продолжительности курса противовирусной терапии (при решенном вопросе о старте терапии).