Synevo — европейская сеть медицинских лабораторий в Украине

Информационная служба:
044 20 500 20 (Киев)
0 800 50 70 30 (Украина)

Телефон для справок: 044 20 500 20, 0 800 50 70 30

Код 4041

Маркеры пролиферации р16 и кі-67

Маркеры пролиферации р16 и кі-67

Код услуги: 4041 . Маркеры пролиферации р16 и кі-67

Цена: 1150 грн.

Ваш город: Киев Вы можете выбрать другой город.
Прокрутить страницу вверх

Описание — свернуть

Markers of Proliferation p16 and Ki-67

Вирус папилломы человека (ВПЧ) признан этиологическим фактором развития рака шейки матки, поэтому выявление данного вируса свидетельствует о наличии риска развития данной онкологической патологии или уже наличии злокачественной трансформации эпителия шейки матки. Это положено в основу мировых алгоритмов использования ВПЧ-тестирования в рамках цервикального скрининга совместно с цитологическим исследованием для сортировки всех аномальных мазков и в рамках первичного скрининга. Значительно повышая диагностическую чувствительность цервикального скрининга (до 98%), ВПЧ-тестирование имеет недостаточно высокую диагностическую специфичность, что обусловлено, прежде всего, высокой распространенностью данного вируса, особенно в молодом возрасте. Вирус папилломы человека, попадая в клетки эпителия шейки матки, сначала находится в эписомальной форме — стадии, когда происходит репликация вируса, способствующая распространению инфекции. Именно на этой стадии возможна самоэлиминация вируса благодаря особенностям защитных сил организма. При неблагоприятных факторах вирус продолжает персистировать в клетках и переходит в интегрированную форму — это стадия злокачественной трансформации клеток эпителия и развития РШМ, которая связана с интеграцией вируса в геном клетки и экспрессией онкобелков Е6, Е7, которые обеспечивают неконтролируемый рост клеток. Именно эта стадия является предраковой, и все методы, позволяющие ее определить, являются очень важными в скрининге РШМ — на данном этапе лечение путем удаления пораженного участка обеспечивает предупреждение развития РШМ. Одним из методов выявления данной стадии является определение маркеров пролиферации, которые отражают экспрессию онкобелков.
Это определение:

  • р16 — белка, участвующего в контроле жизненного цикла клетки.
  • ki-67 — маркера активной пролиферации.

Определение в одной клетке маркеров пролиферации отражает наличие нарушения контроля над клеточным делением и позволяет выявить клетки, инфицированные ВПЧ с онкогенной трансформацией.

Диагностические вопросы, которые решает определение маркеров пролиферации:

  • 15–20% женщин с LSIL в. мазке Папаниколау могут иметь HSIL (положительный результат р16/ki-67 будет свидетельствовать о HSIL);
  • при нормальных мазках Папаниколау и положительных результатах ВПЧ ВКР у женщины может быть HSIL (маркеры пролиферации позволят уточнить характер изменений в клетках эпителия: в 25% случаев будет положительный результат p16/ki-67, из них в 31% -это HSIL);
  • положительный результат ВПЧ-теста при аномальных мазках Папаниколау не позволит оценить наличие HSIL (ДС ВПЧ ВКР для ЦИН2+ — 19%, CINtecPlus — 96% при одинаковой ДЧ 96%).
Метод исследования:
Двойное окрашивание цитологического мазка
Правила подготовки:
Примечания к правилам подготовки:
Забор клинического материала оптимально осуществлять с 10 по 20 день менструального цикла
Материал для исследований:
Соскоб в растворе
Транспортная среда:
Емкость с фиксирующей транспортной средой BD Sure Path (Becton Dickinson)
Правила транспортировки биоматериала:
При комнатной температуре -- в течении 72 ч. (3 дня). При температуре +2 - +8 °С - 7 суток
ПоказательХарактеристика
Анализатор и тест-системаCINtec PLUS (Roche, Швейцария)
Референтные значенияОтрицательная реакция / Положительная реакция
Показания к назначению
Маркер экспрессии онкобелков Е6, Е7 (злокачественной трансформации)
  • Исключение наличия злокачественной трансформации эпителия шейки матки в случаях выявления инфицирования ВПЧ высокого канцерогенного риска;
  • персистенция ВПЧ более года, особенно на фоне лечения;
  • высокая вирусная нагрузка, выявленная при ВПЧ-тестировании;
  • наличие изменений в ПАП-тесте, особенно на фоне обнаружения ВПЧ;
  • персистенция изменений шейки матки по данным цитологического исследования на фоне проводимого леченияууййй
Интерпретация результатов
При интерпретации результатов необходимо учитывать, что результат исследования считается положительным только в случае выявления в одной клетке окрашивания двух маркеров: р16 и ki-67 одновременно.
Положительный результат:
  • наличие злокачественной трансформации в клетках эпителия шейки матки
Показатель
Характеристика
Анализатор и тест-система
CINtec PLUS (Roche, Швейцария)
Референтные значения
Отрицательная реакция / Положительная реакция
Показания к назначению
Маркер экспрессии онкобелков Е6, Е7 (злокачественной трансформации)
  • Исключение наличия злокачественной трансформации эпителия шейки матки в случаях выявления инфицирования ВПЧ высокого канцерогенного риска;
  • персистенция ВПЧ более года, особенно на фоне лечения;
  • высокая вирусная нагрузка, выявленная при ВПЧ-тестировании;
  • наличие изменений в ПАП-тесте, особенно на фоне обнаружения ВПЧ;
  • персистенция изменений шейки матки по данным цитологического исследования на фоне проводимого леченияууййй
Интерпретация результатов
При интерпретации результатов необходимо учитывать, что результат исследования считается положительным только в случае выявления в одной клетке окрашивания двух маркеров: р16 и ki-67 одновременно.
Положительный результат:
  • наличие злокачественной трансформации в клетках эпителия шейки матки

Цитологическое исследование эпителия шейки матки

Рак шейки матки (РШМ) занимает второе место по распространенности среди онкологических заболеваний в мире и первое место среди причин женской смертности от рака в развивающихся странах. В настоящее время считается доказанной связь инфицирования вирусом папилломы человека (ВПЧ) и риском развития РШМ, т. к. ВПЧ обнаруживается в 99% случаев онкологической патологии шейки матки (ШМ). Считается, что для реализации онкогенного потенциала вирусу необходимо, в среднем, 5–7 лет — это время диагностических возможностей выявления предраковых стадий и своевременного лечения, что является основой предотвращения развития РШМ. Выделяют два основных гистологических типа РШМ: аденокарцинома (10%) и плоскоклеточный рак (90%), в последнее время отмечается рост процента аденокарцином в структуре рака шейки матки (до 20%), что связано с более злокачественным течением и сложностями своевременного выявления (прежде всего, цитологического исследования).

На сегодняшний день в мире разработаны меры первичной (вакцинация против ВПЧ) и вторичной профилактики, которые могут привести, при правильной организации, к полной ликвидации данного злокачественного новообразования.

Лабораторные методы составляют основу цервикального скрининга и постоянно совершенствуются. Основополагающим методом проведения цервикального скрининга на протяжении многих лет в мире признано цитологическое исследование, которое со времени его предложения Дж. Папаниколау в 1943 г. позволило в некоторых странах мира снизить заболеваемость и смертность на 50%-70%. Он предложил использовать цитологию как метод скрининга РШМ и разработал метод окрашивания, который до настоящего времени связывают с его именем — окраска по Папаниколау. ПАП-тест — цитологическое исследование препаратов, окрашенных по методу Папаниколау — основной скрининговый метод выявления предраковых заболеваний и рака шейки матки.

Однако широкое использование цитологического мазка на стекле показало и имеющиеся недостатки — достаточно высокий процент получения некачественных мазков, что требовало повторного забора материала, сложности для просмотра мазка и возможности рассмотреть все структурные элементы клетки. Диагностическая чувствительность, которая обеспечивала бы своевременную выявляемость предраковых состояний, оставляла желать лучшего: в среднем, колебалась около 60%. Это привело к поиску более эффективных методов получения мазка. Жидкостной цитологический анализ (Liquid Based Cytology — LBC) был разработан и предложен в США в 1996 г. Данный метод основан на том, что собранные клетки эпителия шейки матки помещают в специальную жидкую среду, которая обеспечивает сохранение клеток, длительное хранение полученного материала и проведение дополнительных методов тестирования — выявление вируса папилломы человека, маркеров пролиферации р16/ki-67. На сегодняшний день данные две разновидности цитологического исследования: традиционная цитология (мазок на стекле) и цитология на жидкой основе (ПАП-тест) могут быть использованы в рамках цервикального скрининга РШМ.

Цитологические исследования мазков, взятых с поверхности шейки матки (зоны трансформации и цервикального канала), позволяют оценить клеточный состав эпителия и выявить атипичные клетки. При направлении на данное исследование необходимо в направлении указать: предварительный диагноз, дату последних месячных или длительность менопаузы, операции и даты их проведения, прием гормональной терапии (КОК, ЗГТ).

Одним из важных факторов получения качественного материала для исследования является строгое соблюдение правил подготовки к взятию материала из шейки матки: оптимально проводить исследование на 10–20 день менструального цикла, желательно при отсутствии воспалительных процессов в шейке матки, не раннее 24 часов после любых внутривагинальных вмешательств (осмотр гинеколога, кольпоскопия, применение местных препаратов, орошений), коитуса. Оптимально повторное исследование проводить не раннее чем через 3 недели после предыдущего цитологического исследования и 3 месяцев после хирургических вмешательств на шейке матки. Взятие материала осуществляется с 2 точек: зона трансформации и цервикальный канал. Материал должен быть взят специальными инструментами: щетка Валлаха/Cervex-brush, цитобраш (щетка эндоцервикальная). Для адекватной оценки состояния эпителия шейки матки требуется наличие в мазке не менее 10000 хорошо визуализируемых клеток плоского эпителия (для традиционной цитологии) и 5000 для жидкостной цитологии, не менее 10 клеток цилиндрического эпителия цервикального канала и/или метаплазированного эпителия переходной зоны, что свидетельствует о правильном заборе материала для цитологического исследования. Особенно это важно при взятии материала у женщин с 3 типом зоны трансформации (когда зона первичного стыка эпителия располагается глубоко в цервикальном канале) в соответствии с требованиями международной классификации The Bathesda System (TBS, 2001). Неинформативным считается мазок, в котором мало клеток плоского эпителия, материал занимает менее 10% поверхности предметного стекла, более 75% клеточного состава лизировано или плохо просматривается (преобладает детрит, лейкоциты, «толстый» мазок), нет цилиндрического и/или метаплазированого эпителия в мазках женщин репродуктивного возраста. Небрежно выполненный мазок (большое количество слизи, крови, влагалищных выделений; малая площадь мазка; толстый мазок) влияет на качество интерпретации результата исследования.

В случае традиционной цитологии (на стекле) материал наносится на предметное стекло, предварительно промаркированное, и высушивается на воздухе. В случае ПАП-теста (цитология на жидкостной основе) материал (две щеточки) помещается в специальный контейнер с консервирующей жидкостью. Затем в лаборатории с помощью специального оборудования готовят стандартизированные тонкослойные препараты, что позволяет снизить процент некачественных мазков, получаемых при традиционном нанесении на стекло, а цитологу — качественно оценить клеточный материал. Кроме того, оставшийся материал в дальнейшем может быть использован для проведения молекулярно-биологических (выявление маркеров инфицирования ВПЧ), цитохимических исследований (p16, ki-67 и других маркеров пролиферации), молекулярных методов выявления урогенитальных инфекций.

Полученные мазки окрашиваются по методу Папаниколау и оцениваются цитологом с выдачей заключения: в случае традиционной цитологии — по Папаниколау с указанием степени дисплазии, в случае ПАП-теста на жидкостной основе — по системе Bethesda (TBS, 2001 г.). Корреляции между различными системами классификации представлены в таблице.

Система ПапаниколауСистема Bethesda (2001)Система ЦИН (CIN)Система ВОЗ
INILM Норма
IIASC-US
ASC-H
Атипия железистого эпителия
 Атипия
Атипия железистого эпителия
IIILSILКойлоцитозЛегкая дисплазия
CIN I
HSILCIN IIУмеренная дисплазия
IVHSIL AISCIN III CGINТяжелая дисплазия
Плоскоклеточный рак insitu (CIS)
Аденокарцинома in situ (AIS)
VИнвазивный ракИнвазивный ракИнвазивный рак
Система Папаниколау
Система Bethesda (2001)
Система ЦИН (CIN)
Система ВОЗ
I
NILM
 
Норма
II
ASC-US
ASC-H
Атипия железистого эпителия
 
Атипия
Атипия железистого эпителия
III
LSIL
Койлоцитоз
Легкая дисплазия
CIN I
HSIL
CIN II
Умеренная дисплазия
IV
HSIL AIS
CIN III CGIN
Тяжелая дисплазия
Плоскоклеточный рак insitu (CIS)
Аденокарцинома in situ (AIS)
V
Инвазивный рак
Инвазивный рак
Инвазивный рак

В бланке результата ПАП-теста указывается:

  • оценка качества материала: материал полноценный, неудовлетворительный для проведения анализа, удовлетворительный для оценки, но ограничен;
  • специфические инфекционные агенты не обн./обн.: Trichomonas vaginalis, кокко-бацилярная флора, грибы, морфологически сходные с родом Candida spp., бактерии, морфологически сходные с Actinomyces, клеточные изменения, связанные с вирусом Herpex simplex;
  • реактивные изменения: не обнаружены, воспалительные (включая репаративные) слабо выраженные, умеренные, выраженные, атрофия с воспалением (атрофический кольпит), лучевые изменения, изменения, связанные с внутриматочной контрацепцией;
  • изменения плоского эпителия: NILM (тип I, цитограмма в пределах нормы); NILM (тип II, воспалительный тип мазка); ASC-US; ASC-H; LSIL (тип III, легкая дисплазия, ЦИН 1); LSIL (тип III, признаки ВПЧ инфекции, койлоцитоз); HSIL (тип III, умеренная дисплазия, ЦИН 2); HSIL (тип IІІ, тяжелая дисплазия, ЦИН 3); HSIL (тип IV, подозрение на рак, рак in situ); CIS (тип V, инвазивный плоскоклеточный рак).


Сокращения: NILM — Negative for Intraepithelial Lesion or Malignancy (отрицательные в отношении интраэпителиальных поражений и злокачественности); ASC-US — Atypical squamous cells of undetermined significance (атипичные клетки плоского эпителия неясного значения); ASC-H — Atypical squamous cells cannot exclude HSIL (атипичные клетки плоского эпителия, не позволяющие исключить внутриэпителиальные поражения высокой степени злокачественности); LSIL — Low-grade squamous intraepithelial lesion (внутриэпителиальные поражения низкой степени злокачественности); HSIL — High-grade squamous intraepithelial lesion (внутриэпителиальные поражения высокой степени злокачественности).

 

  • Изменения железистого эпителия: AGC-US — атипичные клетки железистого эпителия неясного значения; AGC favor neoplastic — атипичные клетки железистого эпителия с подозрением на неоплазию; AIS — эндоцервикальная аденокарцинома in situ; аденокарцинома.

Описание — свернуть

Маркеры пролиферации р16 и кі-67

Код услуги: 4041 . Маркеры пролиферации р16 и кі-67

Цена: 1150 грн.

Ваш город: Киев Вы можете выбрать другой город.
Прокрутить страницу вверх

Добавление в Корзину

Добавить анализ Антимикросомальные антитела (АСМ тиреоидная) ценой 90 грн. для сдачи в городе Каменец-Подольский?