Маркеры пролиферации р16 и кі-67
Маркеры пролиферации р16 и кі-67
Код услуги: 4041 . Маркеры пролиферации р16 и кі-67
Прокрутить страницу вверхMarkers of Proliferation p16 and
Вирус папилломы человека (ВПЧ) признан этиологическим фактором развития рака шейки матки, поэтому выявление данного вируса свидетельствует о наличии риска развития данной онкологической патологии или уже наличии злокачественной трансформации эпителия шейки матки. Это положено в основу мировых алгоритмов использования
Это определение:
- р16 — белка, участвующего в контроле жизненного цикла клетки.
ki-67 — маркера активной пролиферации.
Определение в одной клетке маркеров пролиферации отражает наличие нарушения контроля над клеточным делением и позволяет выявить клетки, инфицированные ВПЧ с онкогенной трансформацией.
Диагностические вопросы, которые решает определение маркеров пролиферации:
- 15–20% женщин с LSIL в. мазке Папаниколау могут иметь HSIL (положительный результат р16/
ki-67 будет свидетельствовать о HSIL);
- при нормальных мазках Папаниколау и положительных результатах ВПЧ ВКР у женщины может быть HSIL (маркеры пролиферации позволят уточнить характер изменений в клетках эпителия: в 25% случаев будет положительный результат p16/
ki-67 , из них в 31% -это HSIL);
- положительный результат
ВПЧ-теста при аномальных мазках Папаниколау не позволит оценить наличие HSIL (ДС ВПЧ ВКР для ЦИН2+ — 19%, CINtecPlus — 96% при одинаковой ДЧ 96%).
Метод исследования: | ||
---|---|---|
Двойное окрашивание цитологического мазка |
Правила подготовки: | ||
---|---|---|
Примечания к правилам подготовки: | ||
---|---|---|
Забор клинического материала оптимально осуществлять с 10 по 20 день менструального цикла |
Материал для исследований: | ||
---|---|---|
Соскоб в растворе |
Транспортная среда: | ||
---|---|---|
Емкость с фиксирующей транспортной средой BD Sure Path (Becton Dickinson) |
Правила транспортировки биоматериала: | ||
---|---|---|
При комнатной температуре -- в течении 72 ч. (3 дня). При температуре +2 - +8 °С - 7 суток |
Показатель | Характеристика |
---|---|
Анализатор и тест-система | CINtec PLUS (Roche, Швейцария) |
Референтные значения | Отрицательная реакция / Положительная реакция |
Показания к назначению | |
Маркер экспрессии онкобелков Е6, Е7 (злокачественной трансформации)
| |
Интерпретация результатов | |
При интерпретации результатов необходимо учитывать, что результат исследования считается положительным только в случае выявления в одной клетке окрашивания двух маркеров: р16 и ki-67 одновременно. Положительный результат:
|
- Исключение наличия злокачественной трансформации эпителия шейки матки в случаях выявления инфицирования ВПЧ высокого канцерогенного риска;
- персистенция ВПЧ более года, особенно на фоне лечения;
- высокая вирусная нагрузка, выявленная при ВПЧ-тестировании;
- наличие изменений в ПАП-тесте, особенно на фоне обнаружения ВПЧ;
- персистенция изменений шейки матки по данным цитологического исследования на фоне проводимого леченияууййй
Положительный результат:
- наличие злокачественной трансформации в клетках эпителия шейки матки
Цитологическое исследование эпителия шейки матки
Рак шейки матки (РШМ) занимает второе место по распространенности среди онкологических заболеваний в мире и первое место среди причин женской смертности от рака в развивающихся странах. В настоящее время считается доказанной связь инфицирования вирусом папилломы человека (ВПЧ) и риском развития РШМ,
На сегодняшний день в мире разработаны меры первичной (вакцинация против ВПЧ) и вторичной профилактики, которые могут привести, при правильной организации, к полной ликвидации данного злокачественного новообразования.
Лабораторные методы составляют основу цервикального скрининга и постоянно совершенствуются. Основополагающим методом проведения цервикального скрининга на протяжении многих лет в мире признано цитологическое исследование, которое со времени его предложения Дж. Папаниколау в 1943 г. позволило в некоторых странах мира снизить заболеваемость и смертность на 50%-70%. Он предложил использовать цитологию как метод скрининга РШМ и разработал метод окрашивания, который до настоящего времени связывают с его именем — окраска по Папаниколау.
Однако широкое использование цитологического мазка на стекле показало и имеющиеся недостатки — достаточно высокий процент получения некачественных мазков, что требовало повторного забора материала, сложности для просмотра мазка и возможности рассмотреть все структурные элементы клетки. Диагностическая чувствительность, которая обеспечивала бы своевременную выявляемость предраковых состояний, оставляла желать лучшего: в среднем, колебалась около 60%. Это привело к поиску более эффективных методов получения мазка. Жидкостной цитологический анализ (Liquid Based Cytology — LBC) был разработан и предложен в США в 1996 г. Данный метод основан на том, что собранные клетки эпителия шейки матки помещают в специальную жидкую среду, которая обеспечивает сохранение клеток, длительное хранение полученного материала и проведение дополнительных методов тестирования — выявление вируса папилломы человека, маркеров пролиферации р16/
Цитологические исследования мазков, взятых с поверхности шейки матки (зоны трансформации и цервикального канала), позволяют оценить клеточный состав эпителия и выявить атипичные клетки. При направлении на данное исследование необходимо в направлении указать: предварительный диагноз, дату последних месячных или длительность менопаузы, операции и даты их проведения, прием гормональной терапии (КОК, ЗГТ).
Одним из важных факторов получения качественного материала для исследования является строгое соблюдение правил подготовки к взятию материала из шейки матки: оптимально проводить исследование на 10–20 день менструального цикла, желательно при отсутствии воспалительных процессов в шейке матки, не раннее 24 часов после любых внутривагинальных вмешательств (осмотр гинеколога, кольпоскопия, применение местных препаратов, орошений), коитуса. Оптимально повторное исследование проводить не раннее чем через 3 недели после предыдущего цитологического исследования и 3 месяцев после хирургических вмешательств на шейке матки. Взятие материала осуществляется с 2 точек: зона трансформации и цервикальный канал. Материал должен быть взят специальными инструментами: щетка Валлаха/
В случае традиционной цитологии (на стекле) материал наносится на предметное стекло, предварительно промаркированное, и высушивается на воздухе. В случае
Полученные мазки окрашиваются по методу Папаниколау и оцениваются цитологом с выдачей заключения: в случае традиционной цитологии — по Папаниколау с указанием степени дисплазии, в случае
Система Папаниколау | Система Bethesda (2001) | Система ЦИН (CIN) | Система ВОЗ |
---|---|---|---|
I | NILM | Норма | |
II | ASC-US ASC-H Атипия железистого эпителия | Атипия | |
Атипия железистого эпителия | |||
III | LSIL | Койлоцитоз | Легкая дисплазия |
CIN I | |||
HSIL | CIN II | Умеренная дисплазия | |
IV | HSIL AIS | CIN III CGIN | Тяжелая дисплазия |
Плоскоклеточный рак insitu (CIS) | |||
Аденокарцинома in situ (AIS) | |||
V | Инвазивный рак | Инвазивный рак | Инвазивный рак |
ASC-H
Атипия железистого эпителия
В бланке результата
- оценка качества материала: материал полноценный, неудовлетворительный для проведения анализа, удовлетворительный для оценки, но ограничен;
- специфические инфекционные агенты не обн./обн.: Trichomonas vaginalis,
кокко-бацилярная флора, грибы, морфологически сходные с родом Candida spp., бактерии, морфологически сходные с Actinomyces, клеточные изменения, связанные с вирусом Herpex simplex;
- реактивные изменения: не обнаружены, воспалительные (включая репаративные) слабо выраженные, умеренные, выраженные, атрофия с воспалением (атрофический кольпит), лучевые изменения, изменения, связанные с внутриматочной контрацепцией;
- изменения плоского эпителия: NILM (тип I, цитограмма в пределах нормы); NILM (тип II, воспалительный тип мазка);
ASC-US ;ASC-H ; LSIL (тип III, легкая дисплазия, ЦИН 1); LSIL (тип III, признаки ВПЧ инфекции, койлоцитоз); HSIL (тип III, умеренная дисплазия, ЦИН 2); HSIL (тип IІІ, тяжелая дисплазия, ЦИН 3); HSIL (тип IV, подозрение на рак, рак in situ); CIS (тип V, инвазивный плоскоклеточный рак).
Сокращения: NILM — Negative for Intraepithelial Lesion or Malignancy (отрицательные в отношении интраэпителиальных поражений и злокачественности);
- Изменения железистого эпителия:
AGC-US — атипичные клетки железистого эпителия неясного значения; AGC favor neoplastic — атипичные клетки железистого эпителия с подозрением на неоплазию; AIS — эндоцервикальная аденокарцинома in situ; аденокарцинома.